一、菌種簡介
1、菌種名稱:酵米面假單胞菌(酵米面黃桿菌) Pseudomonas Cocovenenans Subsp
2、菌株編號:B82451
3、原始編號:ZSU←SDV 1.50
4、具體用途:分類;研究;教學
二、儲存條件
• 斜面菌種和凍干菌種應在2~8℃保存。
三、培養(yǎng)條件
1、培養(yǎng)基編號: Potato Dextrose Agar PDA (馬鈴薯、葡萄糖瓊脂)
2、培養(yǎng)溫度:37℃
附: -80℃和液氮保藏方法:
(1)培養(yǎng):將菌種接種于合適培養(yǎng)基,培養(yǎng)基用固體或液體均可,對生長較快(如大部分弧菌、希瓦氏菌)和生長較慢的菌株用液體培養(yǎng)基培養(yǎng)比較好。培養(yǎng)時期掌握在對數生長期或對數生長后期。
(2)收集菌體:液體培養(yǎng)時,離心棄去上清液;以平板或斜面培養(yǎng)時,刮取菌體。
(3)保護劑:20%甘油(或20%甘油+5%海藻糖保藏效果更好)滅菌。
(4)分裝:將菌體與保護劑混勻,菌體用量不能太少,混勻后看上去要渾濁;分裝到若干凍存管。
(5)降溫:及時放冰箱,先放-20℃,1-2小時后轉移至-70℃至-80℃。如放入液氨中保藏,須注意樣品溫度降至-40℃以下再放。
(6)活化: 從冰箱或液氮中取出甘油管后,立即放置在40C溫水中搖晃使冰融化,約需50秒-100秒;吸取適量內容物至適宜培養(yǎng)基培養(yǎng)。
*也可從冰箱或液氮中取出后,用低溫冰盒保溫,牙簽刮取少許冰接種至合適培養(yǎng)基,甘油管可再放回原處低溫保藏(注意動作要快避免過度升溫)。
四、注意事項
•凍干首次活化, 干粉要全部用完,不能保留,用0.2-0.5m1的培養(yǎng)液或者無菌水溶解,接種在2支斜面上,因凍干菌種處于休眠狀態(tài),請勿接種多支斜面或平板,以免因接種不足而導致復蘇不成功;
•復蘇后,微生物菌種應保藏于建議的溫度、清潔和千燥的地方,室溫放置時間過長會導致菌種衰退;
•菌種操作應在無菌條件下進行;轉種完畢,應經滅菌再做丟棄處理,以免污染周圍環(huán)境。
•凍干菌復蘇后,應根據菌種狀況及時轉接傳代;
•操作前,如果有不明白之處,應先咨詢我中心技術人員,避免不必要的損失。