細胞特性

1） 來源：多巴胺能神經(jīng)元細胞

2） 含量：>1x106

3） 污染：支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性

4） 規(guī)格：T25 瓶或者 1mL 凍存管包裝

運輸和保存：可選擇干冰運輸及發(fā)送復(fù)蘇存活細胞方式：（1）干冰運輸，收到后

立即轉(zhuǎn)入液氮或者-80 度冰箱凍存或直接復(fù)蘇；（2）存活細胞，收到后應(yīng)繼續(xù)生

長，傳代達到細胞生長狀態(tài)良好時，再進行凍存。具體操作見細胞培養(yǎng)步驟。

收到細胞后請拍照，3 天內(nèi)如果發(fā)現(xiàn)污染，請及時拍照與我們聯(lián)系。

細胞用途：僅供科研使用。

細胞接收后的處理：

1） 收到細胞后，請檢查發(fā)貨培養(yǎng)瓶的狀況，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細

胞有污染，請拍照后及時聯(lián)系我們。

2） 在顯微鏡下確認細胞生長狀態(tài)時，最好在低倍鏡（4 或 5X 物鏡)下進行，能

準(zhǔn)確判斷細胞的傳代密度?？醇毎男螒B(tài)請在 10X 和 20×物鏡下，同時給剛收

到的細胞拍照，（10×，20×）各 2-3 張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存，作為細

胞需要售后時提供收到細胞時細胞狀態(tài)的依據(jù)。

3）

觀察好細胞狀態(tài)后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h。

4） 貼壁細胞：在運輸過程中貼壁細胞會有脫落的現(xiàn)象，如發(fā)現(xiàn)貼壁細胞有脫落

或者脫落后抱團生長，可將 T25 瓶置于 37℃培養(yǎng)箱放置約 2-3h，然后抽出瓶中

的培養(yǎng)基和未貼壁細胞 1000rpm 離心 5 分鐘，棄去上清重懸后接種到加有按照

說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基的原培養(yǎng)瓶中（或新的培養(yǎng)瓶中）。

5） 懸浮細胞：T25 瓶置于 37℃培養(yǎng)箱放置約 2-3h，然后抽出瓶中的培養(yǎng)基和

細胞 1000rpm 離心 5 分鐘，棄去上清重懸后接種到新的培養(yǎng)瓶中（加入按照說

明書細胞培養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基）。

6）備注：運輸用的培養(yǎng)基（灌液培養(yǎng)基）不能再用來培養(yǎng)細胞，請換用按照說

明書細胞培養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。 收到細胞后第一次傳代建

議 1：2 傳代 。

細胞培養(yǎng)步驟

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備 1640 培養(yǎng)基；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%；雙抗，1%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37 攝氏度，培養(yǎng)箱

濕度為 70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。

二． 細胞處理：

1） 復(fù)蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加

入 4mL 培養(yǎng)基混合均勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補

加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)?/font>